Cytiva HiLoad（16/600）Superdex75pg制备级凝胶过滤层析柱 28989333

产品名称:Cytiva HiLoad（16/600）Superdex75pg制备级凝胶过滤层析柱 28989333
产品货号:28989333
产品规格:16*600mm
产品品牌:Cytiva
供应商:Cytiva
产品产地: 进口产品价格:￥35820
产品说明书:有

　　　　　北京　北京

应用范围：蛋白纯化

保存于运输说明：
4至30°C;20%乙醇

详细信息：

名称	品牌	货号	规格	保存
HiLoad Superdex75pg 制备级凝胶过滤层析柱	Cytiva	28989333	16*600mm	4至30°C 20%乙醇

一、产品概述

HiLoad Superdex75pg是一款专为中等规模制备纯化设计的高性能凝胶过滤层析柱，结合了Superdex75pg介质的卓越分离效率与HiLoad系列柱体的高容量特性。HiLoad Superdex75pg预填充柱用于从体积高达5mL或13mL的样本进行重组蛋白高分辨率凝胶过滤层析。

•预填充规格 - 方便且可重现；可与独立泵或层析系统配合使用。

•高分辨率 - 可实现高纯度。

•可放大性 - 使用 Superdex 75 prep grade 填料可扩大分离规模。

•兼容ÄKTA系统 - 通过配件（1/16“）可直接连接 ÄKTA 系统和其他层析系统。

二、核心特性

1.高效分离介质：采用Superdex75pg交联琼脂糖与葡聚糖复合介质，平均粒径 34 µm，分离范围3,000–70,000 Da（球蛋白），分辨率高且峰形对称，确保目标分子与杂质的有效分离。

2.优化柱体设计：柱内径16 mm，柱长600 mm，总柱床体积120mL，线性流速可达1–30cm/h（最佳流速 15 cm/h），平衡时间短，样品载量大（最大样品体积可达柱体积的5%），满足制备级纯化效率需求。

3.化学稳定性：介质兼容广泛的pH范围（2–12）及常用缓冲液（如Tris、PBS、醋酸盐等），耐受1M NaOH在位清洗（CIP），可重复使用，降低实验成本。

4.即开即用：预装柱出厂前经严格质量检测，柱效（理论塔板数N）≥ 4,500块/m，对称性（As）0.8–1.4，即开即用，无需手动装柱，减少实验误差。

5.系统兼容性：标准 1/16 英寸入口接头和 1/8 英寸出口接头，适配 AKTA 系列层析系统及其他主流层析设备，易于集成至现有纯化流程。

三、产品优势

该层析柱填充有Superdex 75 prep grade（pg）填料。此SEC填料结合了优异的机械强度和高亲水性，可实现高流速和极小的非特异性相互作用。陡峭的选择性曲线提供了针对以下分子量范围内的蛋白和其他生物分子的优异分离能力：Mr~ 3000至70000。

四、产品规格

HiLoad Superdex 75 pg
柱床尺寸	16 × 600 毫米
柱床高度	600 毫米
柱床体积	120
流速	<1.0 毫升/分钟
流速	10 厘米/小时 - 50 厘米/小时
包括	拆卸工具、床架筛网、网环（10 μm）、O 形环、堵头和说明书。
订购信息	HiLoad 层析柱是预填充的 xK 层析柱。
样本体积	<= 5 毫升
理论塔板	> 13000 米-1

五、产品组份表

Component	No. supplied
Transport device	1
1/16” male connectors	2
Stop plug	1
HiLoad column	1
Instructions	1

六、应用领域

•纯化解旋酶 RHAU 蛋白以表征 G-quaduplex 识别

•纯化用于结晶的噬菌体蛋白以研究 Cas3 抑制

•分离肉毒杆菌毒素蛋白以研究乳腺癌细胞活化

七、操作方法

（1）使用前准备

1.柱效验证

•确认层析柱标签信息（型号、批次、保存液），新柱需检查包装完整性及柱床是否有气泡或断层。

•使用0.5%乙酸或推荐保存液冲洗系统管路，避免污染层析柱。

•连接层析柱至系统，以1 ml/min流速泵入超纯水，观察基线稳定性及柱压（正常操作压≤0.3 MPa）。

2.缓冲液制备

•根据样品特性选择缓冲液（如PBS、Tris-HCl），用0.22 μm滤膜过滤并脱气，确保无颗粒物及气泡。

•缓冲液pH范围推荐6–8，离子强度0.15–0.5 mol/L（避免高盐导致介质收缩）。

3.样品预处理

•样品经0.22 μm滤膜过滤或12,000×g离心10 min去除沉淀，浓度建议≤20 mg/ml（体积不超过柱床体积的5%）。

（2）装柱与系统连接

1.装柱检查

•垂直固定层析柱，去除上下端保护帽，确保出口端无气泡残留。

•按“下进上出”方向连接管路（注意匹配16 mm接口尺寸），避免死体积过大。

2.平衡层析柱

•以1 ml/min流速泵入缓冲液平衡层析柱，平衡体积≥3倍柱床体积（CV=120 ml，即平衡≥360 ml），直至基线、流速及柱压稳定。

（3）样品上样与洗脱

1.上样操作

•停止流动相，切换至上样阀，用注射器或进样环注入样品（体积≤6 ml，对应5% CV），避免引入气泡。

•缓慢切换阀门至洗脱模式，启动流动相（流速1 ml/min），开始洗脱程序。

2.洗脱条件

•洗脱方式：等度洗脱，全程使用同一缓冲液。

•流速控制：1–1.5 ml/min（根据样品分离度调整，最高不超过2 ml/min）。

•收集体积：根据目标分子大小（Superdex 75 pg分离范围3–70 kDa）设置，通常每管收集1–2 ml。

（4）柱后处理与保存

1.柱再生：样品洗脱完成后，用2倍CV的缓冲液冲洗残留样品，再用1–2 CV的0.5 mol/L NaCl溶液去除强吸附杂质。

2.长期保存：用5–10 CV的保存液（0.05%叠氮化钠水溶液或20%乙醇）冲洗层析柱，流速降至0.5 ml/min避免介质脱水。关闭两端阀门，垂直存放于4–30℃环境，避免阳光直射及剧烈震动。

（5）注意事项

1.压力监控

•实时监测柱压，超过0.3 MPa时立即降低流速，排查管路堵塞或缓冲液黏度问题。

•避免干柱：更换缓冲液或停机时，确保柱床始终浸泡在液体中。

2.样品兼容性

•禁止使用pH＜2或＞12的溶液，避免接触氧化剂（如H₂O₂）及去污剂（如SDS）。

•若样品含有机溶剂，浓度需≤10%（乙醇、乙腈等），否则可能导致介质溶胀。

3.故障处理

•峰形拖尾：检查上样体积是否过大或样品过载，减少上样量至3% CV。

•分离度下降：增加平衡体积或降低流速，必要时用1 mol/L NaOH冲洗（仅用于严重污染，需后续充分平衡）。

八、储存

•储存条件：4~30°C 储存于 20% 乙醇水溶液中，防止微生物污染

九、包装信息

•规格：16 mm×600mm（柱床体积120mL）

•包装：1支/盒，含柱保护盖及使用说明书