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品牌
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名称
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货号
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规格
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保存
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美天旎
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LS Columns
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130-042-401
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25 columns
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10°C~35°C/避光
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一、产品介绍
LS柱是专为正向选择电池而设计的,也适用于强磁标记电池的耗尽。
LS列可以与以下分隔符一起使用:
•MidiMACS™分离器
•QuadroMACS™分离器
•SuperMACS™II分离器,与LS柱适配器结合使用
•MultiMACS Cell24分离器 Plus,与单列适配器结合使用
LS Columns的矩阵由铁磁球组成,这些铁磁球上覆盖着细胞友好的涂层,可以快速温和地分离细胞。当放置在MACS的磁场中时 ® 分隔符,球体将磁场放大10,000倍,从而在柱内产生高梯度。这对于仅以MACS标记的细胞进行隔离至关重要 ® 微珠,为同时进行抗体染色留下足够的自由表位。球之间的空间比原生细胞和大多数培养细胞大几倍。这允许细胞自由地在柱中流动。磁性标记的电池悬浮在柱内,实际上并不“粘合”柱基。这种暂停最大限度地减少了细胞的压力,并通过避免细胞聚集实现有效的无菌清洗。
LS柱可用于分离尺寸小于30μm的材料。这些柱子以无菌方式单独包装。
二、核心特性
1.高效分离性能:采用高分辨率层析介质,粒径分布均匀(典型粒径范围45~165μm),结合优化的柱床设计,可实现目标生物分子(如细胞、蛋白、抗体等)的快速捕获与洗脱,提高分离纯度与回收率。
2.即用型设计:每支层析柱为独立无菌包装,即开即用,无需手动填充介质,减少操作误差与交叉污染风险,节省实验准备时间。
3.兼容性广泛:适配美天旎自动化分离系统(如AutoMACS® Pro Separator)及常规手动操作流程,支持多种缓冲液体系,满足不同实验需求。
4.批次一致性:严格的生产质控确保每支层析柱的介质填充量、流速及分离性能高度一致,实验结果重复性好。
三、技术规格(130-042-401)
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标记细胞的最大数量
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最大总细胞数
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手动使用
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1×108
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2×109
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与MultiMACS配合使用Cell24分离器Plus
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1×108
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1×109
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▲ 注:分离大于淋巴细胞的细胞时,柱容量可能会降低。请参阅相应的MACS细胞分离试剂数据表,以获取除淋巴细胞外其他细胞的柱容量信息。
• 白细胞推荐样本量:10⁵~10⁸标记细胞/10⁷~2×10⁹总细胞。
• 典型富集倍数:根据磁性标记的强度和特异性,可达到50倍至最高1,000倍。通过连续两柱分离可实现高达10,000倍的富集。
• 该柱为“流动停止”柱,不会干涸。
• 空隙容积:400µL;储液器容积:8mL。
• 含0.5%牛血清白蛋白(BSA)的磷酸盐缓冲盐水(PBS)的典型流速为1.2~2.1mL/min。
• LS柱仅限单次使用。
四、应用
LS柱已开发用于从异质性细胞悬液中通过MACS分离器对人类及动物细胞(尤其是稀有细胞)进行正向选择。LS柱还可用于去除高表达磁性标记表面抗原的细胞。此外,该柱亦可用于分离其他生物材料,如植物细胞、细菌、病毒、原生动物、细胞器等。
▲ 请勿将LS色谱柱与除MACS微珠外的其他磁性颗粒联合使用。该色谱柱中的磁力极高,若使用其他磁珠可能损伤生物样本。
▲ LS柱不适用于粒径大于30 µm 的颗粒。为去除团块并防止样品中形成聚集体,需在分离前小心重悬材料,并通过30µm尼龙筛网(预分离过滤器(30 µm),#130-041-407)。
▲ 高粘度样本或缓冲液可能导致色谱柱流速降低或发生柱堵塞。
五、重要安全性信息
△警告根据所用材料的不同,污染或感染可能导致死亡或严重伤害。所有生物材料均应视为具有潜在传染性,必须遵守感染性物质的处理与处置规定。
六、使用带手动分隔符的LS列
(1)LS色谱柱的制备
1. 根据A)或B)将带有翼柱的LS柱插入MACS分隔器前端。
• A)与MIDI MACS或Quadro MACS分隔符配合使用
将MidiMACS分隔器或QuadroMACS分隔器连接至MACSMultiStand,并将LS柱置于分隔器内。在LS柱下方放置收集管。
注:在将MACS柱放入MidiMACS或QuadroMACS分离器的磁场中之前,请检查磁铁间隙中的弹出块是否已安装到位。
注:将QuadroMACS分离器连接至MultiStand时需谨慎操作,避免手指
被卡住(具体操作请参阅QuadroMACS起始试剂盒数据表)。
• B) 与SuperMACS II分离器联用
如需使用LS色谱柱与SuperMACS II分离器,请参阅相应数据表。
2. 通过缓冲液冲洗制备LS色谱柱:向色谱柱顶部加入2 mL脱气缓冲液并让缓冲液流过。LS色谱柱为“流动停止”型,不会干涸。
3. 弃去流出液并更换收集管。LS柱现已准备就绪,可进行磁性分离。
注:填充后立即使用色谱柱,以避免因升温导致气泡形成。填充后不得储存色谱柱。
注:填充缓冲液所需时间取决于储存条件、温度及湿度。因此,该时间可能从数秒至数分钟不等。此填充时间对分离质量无影响。
(2)LS色谱柱磁性分离
▲ 有关磁性标记的详细信息,请参阅MACS细胞分离试剂数据表。
▲ 务必待柱式储液器完全排空后方可进行下一步操作。
1. 将最多108个总细胞重悬于500 µL 缓冲液中。
注:对于较高细胞数量,需相应增加缓冲液体积。
注:使用新鲜抗凝血或缓冲层时,需在分离前用缓冲液按1:2比例稀释。或可采用StraightFrom®全血微珠试剂盒或StraightFrom缓冲层微珠试剂盒与全血柱联用。
注:为去除细胞团块,需将细胞通过预分离滤器(30 µm)过滤。
2. 将细胞悬液上样至制备好的LS柱上。收集含未标记细胞的流穿液。
3. 按照相应MACS细胞分离试剂数据表中所述的脱气缓冲液量洗涤LS柱。收集通过并合并步骤2流出液的未标记细胞。
注:当色谱柱储液器排空时,立即加入缓冲液等分试样进行洗涤步骤。
4. 将LS柱从分液器中取出并置于新的收集管上。
5. 将5 mL缓冲液移液至LS柱上。立即使用柱配套提供的柱塞用力冲洗,以清除磁性标记细胞。
6.(可选)为提高磁性标记组分的纯度,可使用第二根MS色谱柱(最多10 磁性标记细胞)或LS色谱柱(最多10磁性标记细胞)对洗脱组分进行富集。使用新色谱柱重复步骤2至5所述的磁性分离程序。
七、储存
将柱状物储存于+10至+35°C环境中,避光保存。有效期标注于包装盒标签上,过期后请勿使用。