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名称
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品牌
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货号
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规格
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保存
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人AB血清
(来自男性 AB 血浆,美国来源,无菌过滤)
Human Serum, from human maleABplasma,
USA origin, sterile-filtered
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Sigma
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H4522
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100ml
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-20℃
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一、产品介绍
本品为无菌过滤的人AB血清,来源于美国健康男性AB型血浆,经自然凝血(Off-The-Clot, OTC)工艺制备,保留高浓度天然生长因子与生物活性成分。血清呈天然浑浊状(含脂质),为正常物理特性,无透明无脂质版本。质量等级300,经严格检测,可作为细胞培养高效补充剂,适配多种哺乳动物细胞与干细胞培养场景。
Sigma H4522 AB 型人血清是标准化人源细胞培养专用添加试剂,凭借低内毒素、无血型凝集抗体、全流程无菌质控三大核心优势,是干细胞、组织工程、体外免疫学研究的通用标准原料。实验中严格遵循低温分装、缓慢解冻、培养基现配现用的操作规范,可稳定保障细胞增殖、分化类实验的数据重复性与稳定性。
二、来源与供体筛查
1.生物来源:美国健康男性AB型血浆。
2.供体筛查:每位供体经ELISA检测,乙肝、丙肝及 HIV 抗体均为阴性。
3.处理工艺:全血自然凝血获取,无菌过滤除菌,干冰运输,-20℃长期保存。
三、关键质量指标
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指标项目
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标准要求
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实验应用优势
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内毒素含量
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≤10 EU/mL
(经检测)
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低内毒素水平,避免细胞炎症应激、
分化异常、凋亡升高
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血红蛋白
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≤30 mg/dL
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低溶血背景,消除血红素对干细胞增殖、
分化的抑制作用
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无菌性
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无菌过滤
(sterile-filtered)
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出厂无菌,常规实验无需二次过滤
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血型抗体
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无抗 A、抗 B 抗体
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无细胞交叉凝集风险,
适配所有血型人源细胞
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来源
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美国来源
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储存温度
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-20℃
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运输条件
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干冰
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四、应用方向
4.1细胞培养核心应用
1.间充质干细胞(MSC)扩增:用于脂肪组织或骨髓来源 MSC 的高效培养与扩增。
2.干细胞移植相关:角膜缘上皮干细胞移植物生成与移植;造血干细胞扩增培养基中 NK 细胞体外扩增;移植前人胰岛培养技术优化。
3.常规细胞培养:作为人源细胞培养基补充剂,提供生长因子、载体蛋白、黏附因子等,提升细胞贴壁与增殖效率。
4.2 实验研究拓展应用
1.免疫相关研究:淋巴细胞培养补体;免疫组化封闭剂;HLA组织分型阴性对照。
2.检测实验:酶联免疫吸附试验(ELISA)桥连试剂;纸基 ELISA 模拟生物样品;标准曲线稀释剂(如NISTmAb 加标血清、多发性骨髓瘤患者样本)。
五、核心优势
1.人源适配性强:AB 血型不含抗 A、抗B 抗体,为通用型血清,适配几乎所有人源细胞(含干细胞系),降低免疫排斥与交叉反应风险。
2.生物活性完整:自然凝血工艺保留高浓度生长因子与活性蛋白,优于人工处理血清,细胞培养效果更优。
3.质量可控:严格供体筛查 + 无菌过滤 + 内毒素检测,批次稳定性高,附带 COA(分析证书)与 COO(原产地证书)。
4.场景适配广:覆盖干细胞培养、组织工程、细胞治疗、免疫研究等多领域,满足基础科研到临床前研究需求。
六、标准化使用操作说明
6.1储存与运输规范
1.运输条件:全程干冰低温运输,运输过程禁止升温、解冻;
2.长期未开封储存:置于-20℃避光冷冻保存,产品有效期以单批次配套COA分析证书标注为准(常规出厂有效期24个月);
3.分装操作建议:到货后在无菌操作台内分装为5~10mL小份冻存,严禁整瓶反复冻融;反复冻融将破坏血清内生长因子、活性蛋白,直接降低细胞活性;
4.解冻后短期存放:完全解冻后 4℃冷藏保存,建议7日内全部用完,解冻剩余血清不可再次冷冻。
5.外观提示:血清解冻后出现轻微乳白色浑浊为天然脂质析出,属于正常现象,不影响实验使用;若出现明显分层、大量絮状沉淀、异味,需直接报废。
6.2 无菌解冻预处理步骤
1.取分装好的血清冻存管,放置 2~8℃冰箱缓慢过夜解冻;禁止 37℃水浴快速融化,高温会造成蛋白变性失活;
2.完全融化后轻柔颠倒混匀 3~5 次,禁止剧烈摇晃产生大量泡沫;
3.常规细胞培养无需二次过滤;仅高敏感干细胞、低背景免疫实验可使用 0.22μm 滤膜轻度过滤;
4.静置 5 分钟消除表面泡沫后,再添加至基础培养基中使用。
6.3 完全培养基配制标准配比
1.常规干细胞扩增体系:基础培养基(DMEM/α-MEM)+10% H4522 AB 血清+L-谷氨酰胺+青链霉素双抗;
2.高增殖需求原代细胞:血清添加比例上调至 15%~20%;
3.免疫封闭实验:用PBS稀释至5%~10%浓度,作为封闭液使用。
配制示例(100mL完全培养基)
90 mL 基础培养基 + 10 mL H4522 AB 血清 + 1 mL L - 谷氨酰胺 + 1 mL 100× 青链霉素混合液
6.4 细胞培养操作要点
1.配制完成的完全培养基2~8℃避光储存,建议2周内用完;
2.细胞传代、铺板操作时,将完全培养基提前 37℃水浴预温,减少细胞冷应激损伤;
3.干细胞长期传代培养:每 2~3 代更换新鲜配制的完全培养基,防止血清活性营养降解;
4.补体功能相关实验:血清全程 4℃低温操作,禁止 37℃长时间放置,避免补体蛋白失活失效。
七、注意事项与常见问题
7.1产品核心优势对比
1.对比胎牛血清 (FBS):无异种动物蛋白干扰,体外培养环境更贴近人体体内微环境,干细胞分化、增殖实验数据重复性更高;
2.对比 A 型 / B 型人血清:不含血型凝集抗体,通用全部人类细胞,无需提前匹配细胞血型。
7.2禁止使用场景
1.动物体内注射实验:含人源蛋白,存在强免疫原性,不可直接活体注射;
2.极限无内毒素微量检测:本品内毒素上限 10 EU/mL,超高灵敏度内毒素实验需选用特级无内毒素人血清;
3.37℃长时间孵育(超过 48 h):血清活性蛋白快速降解,细胞培养效果大幅下降。
7.3产品报废判定标准
1.出现以下任意一种情况,血清直接废弃,禁止用于实验:
2.解冻后产生大量白色絮状沉淀、液体明显分层;
3.液体变色(发黄、发黑)、伴随酸败异味;
4.镜检可见细菌、支原体等微生物污染。
7.4 有效期说明
1.未开封、-20℃避光储存:有效期以单批次COA证书标注为准;
2.解冻后 4℃冷藏:最长使用周期7天,超期建议废弃。
八、相关文件
可获取分析证书(COA)与原产地证书(COO),支持批次追溯与合规审核。
九、参考文献
1.Adenosine 2A Receptor Blockade as an Immunotherapy for Treatment-Refractory Renal Cell Cancer.
Lawrence Fong et al.
Cancer discovery, 10(1), 40-53 (2019-11-17)
Adenosine mediates immunosuppression within the tumor microenvironment through triggering adenosine 2A receptors (A2AR) on immune cells. To determine whether this pathway could be targeted as an immunotherapy, we performed a phase I clinical trial with a small-molecule A2AR antagonist.
2.Differential effects of corticosteroids and anti-TNF on tumor-specific immune responses: implications for the management of irAEs.
Arianna Draghi et al.
International journal of cancer, 145(5), 1408-1413 (2018-12-24)
Up to 60% of patients treated with cancer immunotherapy develop severe or life threatening immune-related adverse events (irAEs). Immunosuppression with high dose corticosteroids, or tumor necrosis factor (TNF) antagonists in refractory cases, is the mainstay of treatment for irAEs.
3.T cell receptor β-chains display abnormal shortening and repertoire sharing in type 1 diabetes.
Iria Gomez-Tourino et al.
Nature communications, 8(1), 1792-1792 (2017-11-28)
Defects in T cell receptor (TCR) repertoire are proposed to predispose to autoimmunity. Here we show, by analyzing >2 × 10.